逆转录病毒(Retrovirus) 是一类已知的RNA 病毒。需在逆转录酶的作用下首先将RNA 转变为cDNA，再在DNA 复制、转录、翻译等蛋白酶作用下扩增的一类病毒。该载体系统有两部分组成，一是带有外源基因的重组反转录病毒载体分子，二是能以反式提供病毒结构蛋白的包装细胞，其要求是能高效产生感染靶细胞的重组病毒颗粒，且无野生型的反转录病毒存在，后者是基因治疗安全性的关键问题。
服务优势:
1. 转染范围广，可以感染各种细胞类型，如淋巴细胞或肝细胞、肌细胞等；
2. 转入的外源基因可完全整合；
3．对细胞感染率高，达到100 %；
4．感染细胞不产生病变，可建立细胞系长期持续表达外源基因。
逆转录病毒载体的不足之处，如:
1．只能整合至分裂期细胞；
2．可插入外源基因片断小（<10kb），难以满足较大基因的插入；
3．病毒滴度是限制临床应用的主要方面；
4．有产生野生型病毒或辅助型病毒的可能，随机整合可能产生不良作用。
服务内容：
- 瞬时基因沉默；
- 稳定基因沉默。
服务流程：
1.含目的基因的逆转录病毒载体的构建和纯化提取；
2.逆转录病毒表达载体和辅助质粒共转染293T细胞；
3.大约在转染48 h后，收获逆转录病毒上清，轻轻地移出上清，用0.45μm的滤膜过滤，或在4℃以500g离心5min以除去活细胞；
4.如果在1～2 h内使用逆转录病毒上清，将其放置在冰上，若时间间隔较长时，置于干冰上冰冻，而后转到-70℃贮存；
5.融化冰冻的上清，在37℃下加温片刻，立即使用。
客户提供：
所要表达的外源基因名称或序列和所要选择的穿梭载体。
我们提供：
提供重组后的腺病毒载体质粒（4μg），并附上重组成功的酶切鉴定结果及对目的基因的PCR鉴定结果。