大鼠降钙素原（PCT）ELISA试剂盒使用说明书

标本的采集及保存

1、 血清：全血标本请于室温放置2小时或4 过夜后于1000 g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20 或-80 保存，但应避免反复冻融。

2、 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于 1000 g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20 或-80 保存，但应避免反复冻融。

3、 其它生物标本：请1000 g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20 或-80 保    存，但应避免反复冻融。

操作步骤

实验开始前，各试剂均应平衡至室温，试剂不能直接在37 溶解；试剂或样品配制时，均需充分混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

1、 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液 100 ，余孔分别加标准品或待测样品100 ，注意不要有气泡，加样 时将样品加于酶标板底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37 温育2小时。为保证实验结果有效

性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2、 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100 （临用前配制），酶标板加上覆膜，37 温育1小时。

3、 弃去孔内液体，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分钟，大约400 /每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

4、 每孔加检测溶液B工作液（临用前配制）100 ，加上覆膜，37 温育1小时。

5、 弃去孔内液体，甩干，洗板5次，方法同步骤3。

6、 每孔加底物溶液90 ，酶标板加上覆膜37 避光显色（反应时间控制在15-30分钟，当标准孔的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显时，即可终止）。

7、 每孔加终止溶液50 ，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物    液的加入顺序相同。

8、 立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度（ 值）。

说明

1、  由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析，

    本产品可能存在一定的质量技术风险。

2、  最终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关，请务必

准备充足的标本备份。

3、 在储存及温育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和微生物的   污染，因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。

4、 试剂盒保存：请收到试剂盒后尽快将标准品、检测溶液A和检测溶液B保存于-20 ，其余试剂短期保存请置于4 ，长期保存则置于-20 。开封后的酶标板要密封加干燥剂后保存于-20 ，避免潮湿。

5、 浓洗涤液会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。

6、 刚开启的酶联板孔中可能会有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。

7、 有效期：6个月。

8、 本操作说明适用于48T试剂盒，但48T试剂盒所有试剂减半。